國家食品藥品監(jiān)督管理總局

食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)疫苗生產(chǎn)場地變更質(zhì)量可比性研究技術(shù)指導(dǎo)原則的通知

食藥監(jiān)藥化管〔2014〕1號




各省、自治區(qū)、直轄市食品藥品監(jiān)督管理局：

　　為進(jìn)一步加強疫苗生產(chǎn)場地變更的注冊管理，指導(dǎo)和規(guī)范該類變更事項，國家食品藥品監(jiān)督管理總局組織制定了《疫苗生產(chǎn)場地變更質(zhì)量可比性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》，現(xiàn)予印發(fā)。


　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　國家食品藥品監(jiān)督管理總局
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　2014年1月8日


疫苗生產(chǎn)場地變更質(zhì)量可比性
研究技術(shù)指導(dǎo)原則

　　疫苗生產(chǎn)場地變更是指疫苗生產(chǎn)企業(yè)在異地或原址新建疫苗生產(chǎn)廠房并搬遷至新廠房。為指導(dǎo)該類變更事項，保證變更前后產(chǎn)品的一致性，特制定本指導(dǎo)原則。異地新建和原址新建車間需按本指導(dǎo)原則執(zhí)行，原生產(chǎn)車間改建、擴(kuò)建可參照本指導(dǎo)原則進(jìn)行相關(guān)可比性研究。

　　原則上場地變更不應(yīng)改變疫苗的生產(chǎn)工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，但生產(chǎn)場地變更過程中可能伴隨淘汰落后工藝引入先進(jìn)技術(shù)而進(jìn)行的設(shè)備更新、生產(chǎn)規(guī)模調(diào)整和部分工藝調(diào)整，如將轉(zhuǎn)瓶生產(chǎn)調(diào)整為細(xì)胞工廠生產(chǎn)，透析工藝調(diào)整為超濾工藝，同種原理的層析柱介質(zhì)的升級等。上述調(diào)整可能伴隨工藝參數(shù)的改變，變更后生產(chǎn)工藝的過程控制應(yīng)達(dá)到與變更前相似或更有效的控制水平，產(chǎn)品質(zhì)量應(yīng)高度相似或有所提高。

　　一、可比性研究的基本原則
　　可比性是指通過對生產(chǎn)場地變更前后的生產(chǎn)工藝、過程控制、質(zhì)量指標(biāo)等的研究，證明場地變更前后產(chǎn)品質(zhì)量屬性高度相似，變更未對產(chǎn)品的安全性、有效性產(chǎn)生不利影響。
　　質(zhì)量可比性是變更評價的基礎(chǔ)�？杀刃匝芯繎�(yīng)通過獲得場地變更前后的數(shù)據(jù)，將得到的結(jié)果和預(yù)先定義的可接受標(biāo)準(zhǔn)相比較，以客觀的評估產(chǎn)品在場地變更前后是否具有可比性�？杀刃匝芯績�(nèi)容可以為一系列質(zhì)量分析比較實驗，在有些情況下還包括非臨床和臨床數(shù)據(jù)。如果企業(yè)能夠僅通過質(zhì)量分析即可確�？杀刃裕瑒t無需進(jìn)行生產(chǎn)場地變更后的臨床試驗。當(dāng)質(zhì)量分析對比結(jié)果不被接受或變更前后產(chǎn)品出現(xiàn)較大差異或可比性研究項目存在欠缺，無法通過非臨床研究證實變更對產(chǎn)品安全性、有效性產(chǎn)生的影響時，需要進(jìn)行橋接性或確證性的臨床試驗。
　　證明可比性并不意味著產(chǎn)品的質(zhì)量屬性在場地變更前后是完全等同的，但應(yīng)該是高度相似的，并且依據(jù)現(xiàn)有的知識和研究結(jié)果足以預(yù)期其在產(chǎn)品質(zhì)量屬性方面的差異不會對產(chǎn)品的安全性和有效性產(chǎn)生任何不良影響。

　　二、可比性研究方案設(shè)計
　　作為變更研究實施的主體，疫苗生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)做好完整的設(shè)計和研究計劃，建立完善的風(fēng)險控制和管理機(jī)制，對于場地變更應(yīng)從技術(shù)層面給予充分的評估和驗證，保證場地變更不會導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量發(fā)生變化。

　　可比性研究為一個體系，包括研究設(shè)計、實施及對研究數(shù)據(jù)的評價等。企業(yè)應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品質(zhì)量屬性和工藝特點合理地、規(guī)范地進(jìn)行可比性研究設(shè)計�？杀刃匝芯吭O(shè)計應(yīng)基于風(fēng)險評估的原則。疫苗生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)評估場地變更過程中伴隨的原材料變更風(fēng)險，引入的設(shè)備變更或工藝調(diào)整是否涉及關(guān)鍵工藝，該工藝與產(chǎn)品質(zhì)量屬性的關(guān)聯(lián)性及可能影響產(chǎn)品的哪些特征，這些特征歷史數(shù)據(jù)收集的具體情況用于可比性研究是否充分，以確定可比性研究的策略和具體研究內(nèi)容。

　　整體上，質(zhì)量可比性研究包括兩產(chǎn)地原材料、生產(chǎn)工藝、產(chǎn)品質(zhì)量的可比和穩(wěn)定性可比等，其中預(yù)設(shè)的比較參數(shù)及其驗收標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)性、全面性、合理性是評價的重點。疫苗生產(chǎn)企業(yè)需對可比性研究項目進(jìn)行認(rèn)真梳理，包括從投料開始至生產(chǎn)出成品整個過程中各個步驟的中間產(chǎn)品、原液、半成品及成品的質(zhì)控指標(biāo)，尤其是影響疫苗安全性和有效性的重要指標(biāo)；同時需確定可比性研究需要比較的工藝參數(shù)和產(chǎn)品質(zhì)量參數(shù)、取樣階段、檢測方法和驗收標(biāo)準(zhǔn)，確定工藝驗證的范圍、方法和接受標(biāo)準(zhǔn)。

　　采用的比較方式包括與歷史數(shù)據(jù)的比較和平行試驗比較，工藝可比性主要為場地變更后驗證批次生產(chǎn)過程中的工藝參數(shù)、產(chǎn)品質(zhì)量參數(shù)、批放行數(shù)據(jù)與原產(chǎn)地歷史數(shù)據(jù)的比較，質(zhì)量屬性可比性研究和穩(wěn)定性可比性研究可選用與歷史數(shù)據(jù)的比較，但平行試驗更具有說服力。對于檢測方法變異大的比較項目，如某些產(chǎn)品效價測定、動物免疫原性研究，建議采用歷史數(shù)據(jù)的比較并增加平行試驗比較。該情況下應(yīng)注意原場地生產(chǎn)產(chǎn)品的留樣，且進(jìn)行實驗時盡量控制可變性因素和主觀因素以獲得可靠的比較結(jié)果。

　　可比性的驗收標(biāo)準(zhǔn)不等于質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，其重點在于變更后生產(chǎn)數(shù)據(jù)與歷史數(shù)據(jù)趨勢分析的比較�？杀刃匝芯吭O(shè)計中，對于工藝可比性研究、質(zhì)量屬性可比性研究和穩(wěn)定性可比性研究均應(yīng)前瞻性地定義可比性研究的驗收標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)研究方法的性質(zhì)，可比性研究驗收標(biāo)準(zhǔn)可分為定量標(biāo)準(zhǔn)和定性標(biāo)準(zhǔn)。作為定量標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)基于歷史批次數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，根據(jù)統(tǒng)計學(xué)建立驗收標(biāo)準(zhǔn)。生產(chǎn)企業(yè)歷史批次的選取將影響驗收標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)性及全面性，在選取批次時應(yīng)考慮生產(chǎn)工藝及其控制的全面性、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的不斷改進(jìn)、生產(chǎn)年份等因素，選取足夠的、有代表性的歷史批次進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計以建立驗收標(biāo)準(zhǔn)。一般情況下，應(yīng)選用近幾年的批次，總數(shù)應(yīng)具有統(tǒng)計學(xué)意義。對于采用的統(tǒng)計學(xué)方法，應(yīng)詳細(xì)敘述所用統(tǒng)計學(xué)方法的理由和原理。通常定量標(biāo)準(zhǔn)的驗收標(biāo)準(zhǔn)采用歷史數(shù)據(jù)的95％可信區(qū)間，并應(yīng)不低于質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。企業(yè)可根據(jù)具體情況制定更高的、更合理的驗收標(biāo)準(zhǔn)。定性標(biāo)準(zhǔn)作為定量標(biāo)準(zhǔn)的補充，可更全面地展現(xiàn)產(chǎn)品情況，主要指變更前后產(chǎn)品檢測圖譜具有重疊性。

　　場地變更后應(yīng)至少以上市規(guī)模進(jìn)行3批產(chǎn)品的連續(xù)生產(chǎn)，驗證批次的工藝、質(zhì)量屬性及穩(wěn)定性等方面的研究數(shù)據(jù)符合預(yù)先設(shè)定的驗收標(biāo)準(zhǔn)方可認(rèn)為變更前后產(chǎn)品具有可比性。

　　在符合驗收標(biāo)準(zhǔn)的前提下，對于定量標(biāo)準(zhǔn)項目，鼓勵對變更后的驗證批次進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)趨勢分析，將變更后產(chǎn)品的研究數(shù)據(jù)與原生產(chǎn)場地的歷史數(shù)據(jù)趨勢、設(shè)定的警戒限、糾偏限進(jìn)行比較，對于符合驗收標(biāo)準(zhǔn)但連續(xù)超出歷史批次范圍的參數(shù)或顯示一定偏離趨勢的參數(shù)或超出警戒限及糾偏限的參數(shù)應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一步的分析評估，證實該偏離是否對產(chǎn)品的安全性、有效性產(chǎn)生影響。該分析依賴于變更后生產(chǎn)驗證批次的數(shù)目，驗證批次越少，偏差越大。如果現(xiàn)有的變更后的批次過少無法進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)趨勢分析，可以在上市后完成。

　　企業(yè)在申請疫苗生產(chǎn)場地變更時需按照上述要求同時提交可比性研究設(shè)計方案和研究結(jié)果。
　　三、生產(chǎn)過程及產(chǎn)品質(zhì)量的可比性研究
　　(一)生產(chǎn)用原材料方面
　　場地變更后應(yīng)使用與變更前相同的原材料，即原材料生產(chǎn)廠家、級別、檢測方法、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)與原產(chǎn)地相同。在特殊情況下，如有生產(chǎn)廠家的變更，原材料的級別、標(biāo)準(zhǔn)不應(yīng)降低，并應(yīng)采用變更后的原材料進(jìn)行驗證。
　　企業(yè)在申請疫苗生產(chǎn)場地變更時，應(yīng)按照可比性研究設(shè)計方案，以表格的形式匯總比對兩個場地所使用的原材料和輔料的等級、涉及的工藝步驟、生產(chǎn)企業(yè)、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等，并提交有關(guān)資料。

　�。ǘ�）生產(chǎn)工藝方面
　　疫苗的質(zhì)量依賴于生產(chǎn)工藝的全過程控制，生產(chǎn)工藝可比性是本指導(dǎo)原則中最重要的部分。疫苗生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)按照可比性研究設(shè)計方案，提供場地變更前后工藝差異的概述，并說明依據(jù)及目的；并以表格的形式提交兩個生產(chǎn)場地的設(shè)備、工藝參數(shù)和產(chǎn)能等的對比。生產(chǎn)工藝可比性研究通常包括操作參數(shù)的可比性研究和性能參數(shù)可比性研究，此外還包括部分工藝驗證。

　　1.工藝參數(shù)的可比性研究
　　應(yīng)結(jié)合工藝、產(chǎn)品屬性的研發(fā)數(shù)據(jù)和歷史經(jīng)驗以及生產(chǎn)企業(yè)的生產(chǎn)經(jīng)驗進(jìn)行工藝關(guān)鍵性分析，通過分析定義需要比較的工藝步驟及其工藝參數(shù)，需要考慮的工藝參數(shù)包括關(guān)鍵工藝參數(shù)和重要工藝參數(shù)。國際工業(yè)組織對于關(guān)鍵工藝參數(shù)和重要工藝參數(shù)進(jìn)行了定義，關(guān)鍵工藝參數(shù)為生產(chǎn)企業(yè)根據(jù)研發(fā)經(jīng)驗已證實影響產(chǎn)品關(guān)鍵質(zhì)量屬性需要嚴(yán)格控制的工藝參數(shù)。重要工藝參數(shù)為除關(guān)鍵工藝參數(shù)外仍需要精密控制在一定范圍的參數(shù)。根據(jù)對產(chǎn)品的常規(guī)理解，通常關(guān)鍵工藝參數(shù)和重要工藝參數(shù)包括發(fā)酵工藝中的溫度、pH、溶氧，病毒接種MOI，層析純化工藝上樣量和洗脫體積，滅活工藝中的滅活劑濃度和滅活時間等。由于關(guān)鍵工藝參數(shù)分析方法的不同，不同生產(chǎn)企業(yè)定義的關(guān)鍵工藝參數(shù)和重要工藝參數(shù)有所不同。需根據(jù)統(tǒng)計學(xué)分析建立或根據(jù)已有工藝驗證結(jié)果建立工藝參數(shù)可比性研究的驗收標(biāo)準(zhǔn)。
　　對于不涉及設(shè)備或工藝調(diào)整的工藝步驟，變更后的批次數(shù)據(jù)必須在基于歷史數(shù)據(jù)設(shè)定的驗收標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)。對于涉及設(shè)備或工藝調(diào)整的工藝步驟，如轉(zhuǎn)瓶生產(chǎn)變更為細(xì)胞工廠生產(chǎn)，一些工藝參數(shù)會發(fā)生改變，故無法預(yù)設(shè)驗收標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)通過可比性研究或工藝驗證保證調(diào)整后的工藝控制與變更前一致或更有效，且產(chǎn)品的質(zhì)量參數(shù)與變更前可比，如有必要對變更后工藝應(yīng)增加中間控制點。

　　2.性能參數(shù)可比性研究：疫苗生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)按照可比性研究設(shè)計，分析可比性研究的驗收標(biāo)準(zhǔn)，包括整個過程中各個步驟的中間產(chǎn)品、原液、半成品和成品的質(zhì)控指標(biāo)，尤其是影響疫苗安全性和有效性的重要指標(biāo)。一般可分為常規(guī)生產(chǎn)中已設(shè)定的檢測指標(biāo)和沒有設(shè)定的檢測指標(biāo)，常規(guī)生產(chǎn)中已設(shè)定的檢測指標(biāo)通常為企業(yè)注冊標(biāo)準(zhǔn)或中國藥典中包括的指標(biāo)，例如病毒/細(xì)菌收獲液的滴度或收獲量、滅活試驗、鋁吸附率等。常規(guī)生產(chǎn)中沒有設(shè)定的檢測指標(biāo)包括純化工藝中去除工藝相關(guān)雜質(zhì)的效果（如宿主細(xì)胞DNA、蛋白去除率，有機(jī)溶劑的去除等）、純化工藝產(chǎn)物收率、層析洗脫液中目的產(chǎn)物純度、洗脫液生物負(fù)荷及內(nèi)毒素含量等。由于不同疫苗的生產(chǎn)工藝差異很大，因此本指導(dǎo)原則不可能全面列舉所有生產(chǎn)工藝可比性研究項目，企業(yè)應(yīng)結(jié)合每個疫苗的特性，分析整個生產(chǎn)工藝中所有可能影響疫苗質(zhì)量的關(guān)鍵點，盡可能全面地設(shè)計生產(chǎn)工藝可比性研究項目。

　　3.部分工藝驗證：在場地變更中，部分工藝驗證數(shù)據(jù)可在上述可比性研究中得到同步驗證。應(yīng)對重要的生產(chǎn)工藝進(jìn)行驗證，例如病毒/細(xì)菌滅活效果驗證等。對于發(fā)生改變的工藝參數(shù)（包括更新的設(shè)備等）也需要進(jìn)行驗證，如轉(zhuǎn)瓶生產(chǎn)調(diào)整為細(xì)胞工廠生產(chǎn)，透析工藝調(diào)整為超濾工藝，同種原理的層析柱介質(zhì)的升級等。通過工藝驗證應(yīng)證實調(diào)整后工藝操作范圍具有穩(wěn)定性，工藝過程控制程度、產(chǎn)品質(zhì)量屬性與變更前可比，并具有較好的工藝穩(wěn)定性。如工藝調(diào)整涉及層析柱使用壽命改變、中間產(chǎn)物存放時間改變，則應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的驗證研究。
　�。ㄈ�）質(zhì)量對比分析方面
　　疫苗生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)按照可比性研究設(shè)計，提供場地變更前后質(zhì)量方面差異的概述，并說明依據(jù)及目的；以表格的形式提交兩個生產(chǎn)場地的產(chǎn)品質(zhì)量分析項目、分析方法、結(jié)果、判定標(biāo)準(zhǔn)等。

　　1.質(zhì)量分析方法
　　可比性研究依賴于分析方法，對工藝過程中間產(chǎn)物的分析或?qū)υ�液及成品的分析，采用的分析方法均�?yīng)足夠的敏感并可以最大限度的檢測到產(chǎn)品質(zhì)量發(fā)生的改變。通常應(yīng)采用中國藥典收載的方法，若采用中國藥典尚未收載的方法，需進(jìn)行系統(tǒng)的方法學(xué)驗證并達(dá)到相關(guān)要求。
　　兩個生產(chǎn)場地的產(chǎn)品質(zhì)量分析方法應(yīng)保持一致，并應(yīng)進(jìn)行場地變更后的方法學(xué)適應(yīng)性驗證。如果場地變更存在檢測方法的修訂（如檢測試劑盒生產(chǎn)廠的變更），應(yīng)說明選用修訂后方法的合理性，進(jìn)行全面的修訂后檢測方法的方法學(xué)驗證，并進(jìn)行與原檢測方法的相關(guān)性研究，證實修訂后檢測方法與原檢測方法的等效性。如修訂前后檢測結(jié)果存在較大差異，應(yīng)進(jìn)行相關(guān)分析。對于質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測項目的檢測方法修訂應(yīng)謹(jǐn)慎，在場地變更的初始階段仍需按照原檢測方法進(jìn)行批次放行，修訂后的檢測方法可作為補充項目進(jìn)行平行檢測，經(jīng)大量的驗證研究后方可采用修訂后的方法替代原檢測方法。如適用，驗證工作中需考慮新的檢測方法與疫苗臨床效應(yīng)的相關(guān)性。

　　2.產(chǎn)品質(zhì)量和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
　　對僅限于生產(chǎn)場地的變更，原則上場地變更后的產(chǎn)品質(zhì)量和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)與場地變更前一致。如果存在檢測方法的修訂，并且修訂后的方法與原方法存在檢測靈敏度的差異并導(dǎo)致質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的差異，采用修訂后方法建立的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)不低于變更前原產(chǎn)品的實際質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，以保證產(chǎn)品質(zhì)量不降低。
　　如場地變更伴隨設(shè)備更新及規(guī)模調(diào)整，場地變更后的產(chǎn)品質(zhì)量和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不能低于場地變更前的質(zhì)量和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并鼓勵企業(yè)提高產(chǎn)品質(zhì)量和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
　　雜質(zhì)水平比較是產(chǎn)品質(zhì)量可比性研究的重要部分。應(yīng)最大限度降低工藝相關(guān)雜質(zhì)和產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)。除質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項目外，還有部分工藝相關(guān)雜質(zhì)和產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)未納入到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品類型和生產(chǎn)工藝的具體情況進(jìn)行全面的工藝相關(guān)雜質(zhì)和產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)的比較研究。
　　應(yīng)通過過程控制參數(shù)的設(shè)置進(jìn)行變更后產(chǎn)品全面的污染物水平分析，如收獲液檢測、層析洗脫液微生物負(fù)荷、內(nèi)毒素含量檢測等。

　�。ㄋ模┓�(wěn)定性可比性研究方面
　　穩(wěn)定性研究對比是可比性研究重要的組成部分，穩(wěn)定性試驗可發(fā)現(xiàn)理化特性分析試驗不能發(fā)現(xiàn)的細(xì)微差異。

　　穩(wěn)定性研究可比主要是指加速和/或強制降解穩(wěn)定性研究中產(chǎn)品的降解模式、降解途徑和降解速率可比。建議采用兩個生產(chǎn)場地各至少3批疫苗進(jìn)行比對分析；也可以與歷史數(shù)據(jù)進(jìn)行可比性分析。

　　加速和強制降解穩(wěn)定性試驗是場地變更前后產(chǎn)品一致性比較的有力工具，考察條件通常采用高溫。穩(wěn)定性研究可比性主要關(guān)注降解途徑、降解模式和降解率的可比性，應(yīng)選擇可反映降解模式的敏感考察指標(biāo)，例如效力試驗、多糖分子量大小、游離多糖等直接反應(yīng)疫苗效力的指標(biāo)以及一般的理化特性，此外，需注意選擇適宜的考察條件和考察頻率以得到理想的降解曲線。其驗收標(biāo)準(zhǔn)可包括降解曲線斜率的一致性、降解曲線的重疊等。

　　如果穩(wěn)定性研究結(jié)果表明產(chǎn)品間存在差異時，就必需進(jìn)行額外的研究評價，同時還應(yīng)對生產(chǎn)工藝及貯存過程采取額外的控制措施以避免不可預(yù)期的差異。

　　關(guān)于疫苗保存條件和有效期的確定，應(yīng)以長期穩(wěn)定性研究結(jié)果為準(zhǔn)。在場地變更的特殊情況下，可根據(jù)加速穩(wěn)定性試驗和長期穩(wěn)定性試驗的初步結(jié)果暫定保存條件和有效期，原則上參照原場地生產(chǎn)疫苗的保存條件和有效期。但是，企業(yè)應(yīng)提交相關(guān)長期穩(wěn)定性研究計劃及承諾，如考察期間出現(xiàn)意外情況，應(yīng)及時通報監(jiān)管部門。
　　四、不同疫苗的特性分析
　　質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)只是確定產(chǎn)品的常規(guī)質(zhì)量而不是對產(chǎn)品進(jìn)行全面的鑒定，因此不足以評價場地變更引起的所有影響。可比性研究的質(zhì)量對比分析需在放行檢測項目的基礎(chǔ)上進(jìn)行擴(kuò)展，通常包括結(jié)構(gòu)特征、純度、動物免疫原性分析等。特性分析指標(biāo)中包括的常規(guī)檢測項目，應(yīng)按照設(shè)計的要求與歷史數(shù)據(jù)進(jìn)行分析比對；對于非常規(guī)檢測項目，考慮到生產(chǎn)企業(yè)積累的歷史數(shù)據(jù)有限，建議采用兩個生產(chǎn)場地各3批進(jìn)行比對分析。

　�。ㄒ唬┙Y(jié)構(gòu)特征指標(biāo)
　　1.基因工程重組疫苗：如重組乙型肝炎疫苗。該類疫苗的目的抗原通常能夠得到較為全面的結(jié)構(gòu)確證，其可比性研究通常應(yīng)考慮蛋白抗原的一級結(jié)構(gòu)（N端、C端測序，肽指紋圖譜、質(zhì)譜分子量測定）及純度等；鼓勵企業(yè)進(jìn)行空間結(jié)構(gòu)（二硫鍵配對、二級結(jié)構(gòu)、三級結(jié)構(gòu)等）以及翻譯后修飾（脫酰氨、氧化等）的結(jié)構(gòu)分析。此外，對于一些可形成病毒樣顆粒的重組疫苗，病毒樣顆粒包裝的完整性會顯著影響疫苗的效力，因此鼓勵企業(yè)進(jìn)行病毒樣顆粒包裝完整性的檢測。

　　2.多糖疫苗：如A群腦膜炎球菌多糖疫苗、A群C群腦膜炎球菌多糖疫苗。該類疫苗的抗原成分為多糖類單一官能團(tuán)，其免疫原性直接受到多糖分子大小差異的影響，因此，多糖分子大小為可比性研究的重點項目，通常采用色譜法證明分子量分布的一致性。鼓勵企業(yè)進(jìn)行與疫苗免疫原性相關(guān)的官能團(tuán)結(jié)構(gòu)確證研究，例如采用核磁共振法測定多糖結(jié)構(gòu)，采用分子尺寸排阻層析法（如HPLC-MALLS）證明分子量分布的一致性。

　　3.減毒活疫苗：如麻疹減毒活疫苗、腮腺炎減毒活疫苗、風(fēng)疹減毒活疫苗等。減毒活疫苗系采用減毒株生產(chǎn)，減毒株的特點系毒力基因發(fā)生突變，導(dǎo)致毒力喪失或明顯下降，并且保護(hù)性抗原基因沒有發(fā)生突變。因此，鼓勵企業(yè)進(jìn)行生產(chǎn)終末代次產(chǎn)品的基因測序，重點進(jìn)行毒力基因及保護(hù)性抗原基因的比對分析。

　　4.滅活疫苗：如無細(xì)胞百白破聯(lián)合疫苗、甲型肝炎滅活疫苗等�？筛鶕�(jù)疫苗特點在適宜的情況下進(jìn)行以下結(jié)構(gòu)特征分析：采用電鏡分析病毒顆粒大小，色譜法分析純度，SDS-PAGE電泳分析及免疫印跡或其他適宜的方法分析保護(hù)性抗原的存在。鼓勵企業(yè)采用質(zhì)譜法分析SDS-PAGE條帶的組分和主要蛋白構(gòu)成。

　　5.結(jié)合疫苗：結(jié)合疫苗為多糖抗原與載體蛋白偶聯(lián)的產(chǎn)物，除需分別進(jìn)行多糖和蛋白的理化結(jié)構(gòu)特征分析外，還需要對多糖/蛋白結(jié)合物進(jìn)行特征分析，通常進(jìn)行鑒別、應(yīng)用分子尺寸排阻層析法（如HPLC-MALLS）證明分子量分布的一致性等。鼓勵企業(yè)進(jìn)行官能團(tuán)狀態(tài)和功能的研究分析，例如測定從多糖活化開始至多糖/蛋白結(jié)合物形成后各個步驟的多糖結(jié)構(gòu)，分析每一步多糖結(jié)構(gòu)的變化；測定未結(jié)合的活化基團(tuán)含量；分析多糖和蛋白的結(jié)合方式等。
　　（二）動物安全性有效性研究
　　疫苗生產(chǎn)場地變更是一個比較復(fù)雜的過程，為了降低臨床上大量人群使用的風(fēng)險，一般需要進(jìn)行動物安全性和有效性的可比性研究�？筛鶕�(jù)不同疫苗的特點，選擇安全性、有效性的評價方法和/或指標(biāo)。安全性方面通�？紤]進(jìn)行局部刺激性試驗和過敏試驗，有效性方面可考慮進(jìn)行動物免疫原性試驗。如果質(zhì)量分析對比結(jié)果不被接受或變更前后產(chǎn)品出現(xiàn)較大差異或可比性研究項目存在欠缺，可進(jìn)行更多的安全性和/或有效性研究,如重復(fù)給藥毒性研究等。

　　動物免疫原性在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中稱為體內(nèi)效力試驗，是疫苗有效性的重要質(zhì)量控制指標(biāo)。對于某些成分復(fù)雜，有效成分尚未完全明確的疫苗，如一些滅活疫苗，可比性研究應(yīng)包括動物免疫原性的對比。一些減毒活疫苗目前無成熟的動物免疫原性檢測方法，如果可以確證場地變更前后生產(chǎn)終末代次毒株毒力基因及保護(hù)性抗原基因未發(fā)生顯著改變，可不再進(jìn)行動物免疫原性的比較。

　　對于質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含有體內(nèi)效力試驗的疫苗，可進(jìn)行擴(kuò)展的動物免疫原性分析，例如炭疽減毒活疫苗、百白破聯(lián)合疫苗需按照質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行攻毒保護(hù)力試驗并增加中和抗體水平研究；出血熱滅活疫苗、卡介苗、鉤端螺旋體滅活疫苗需按照質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行免疫動物后抗體的檢測并增加功能性抗體水平研究；乙型肝炎疫苗可采用動物免疫原性方法（小鼠ED50法）進(jìn)行檢測分析。開展動物免疫原性試驗比較時需進(jìn)行盲法設(shè)計，以減少主觀因素對試驗結(jié)果的影響。

　　鼓勵企業(yè)進(jìn)行“比活性”（活性或抗原含量/總蛋白含量）的研究和分析。鼓勵企業(yè)建立系列的相關(guān)免疫學(xué)功能分析方法，全面評估疫苗的免疫原性。

　　五、注解
　　工藝相關(guān)雜質(zhì)：在生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)，包括來源于宿主細(xì)胞的雜質(zhì)（如殘留的宿主細(xì)胞DNA、殘留的宿主細(xì)胞蛋白等）、來源于細(xì)胞培養(yǎng)基的雜質(zhì)（如牛血清、抗生素等）、下游工藝雜質(zhì)（如有機(jī)溶劑、核酸酶、金屬離子等）。

　　產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)：與產(chǎn)品有關(guān)的雜質(zhì)，其安全性、有效性、免疫原性等性質(zhì)與預(yù)期產(chǎn)品不同，如包裝不完整的病毒樣顆粒、多糖疫苗中低分子量的部分、多糖結(jié)合疫苗中的游離多糖等。

　　工藝參數(shù)：生產(chǎn)工藝中的輸入變量和生產(chǎn)工藝條件，這些參數(shù)通常是物理或化學(xué)參數(shù)(如：溫度、工藝時間、柱流速、柱的洗脫體積、試劑濃度或緩沖液 pH等)。

　　質(zhì)量參數(shù)：中間產(chǎn)物或產(chǎn)品的質(zhì)量特性，可用于評估工藝性能是否達(dá)到預(yù)期目的，如中間產(chǎn)物或產(chǎn)品的雜質(zhì)含量、純度、外源因子檢測結(jié)果等。